Liebe Leser:innen,
zunächst wünsche ich Ihnen ein gesundes, zufriedenes und erfolgreiches Jahr 2023.
Im letzten HPLC-Tipp des Jahres 2022 hatte ich Ihnen die Kurztabelle „Symptome-Ursachen“ in der Routine-HPLC vorgestellt.
In der zusätzlichen Spalte nun „Welches Symptom noch?“ finden Sie weitere Informationen, die man/frau dem Chromatogramm bzw. den Anzeigen am Gerät entnehmen kann. Diese helfen, die jeweilige Ursache(n) noch genauer zu spezifizieren bzw. noch mehr einzugrenzen.
| Änderung (Symptom) | Ursache(n) | Welches Symptom noch? | Kommentar |
| ∆ A + ∆ H | 1. ∆ Injektionsvolumen 2. Irreversible Adsorption (Physisorption, Memory-Effekt) 4. Instabile Probe 5. ∆ pH-Wert 6. ∆ Probekonzentration |
5. ∆ Peakform | 1. Neben Luft und verstopfte Nadel durch “Krümmelchen”, auch unpassende Ansaug- und/oder Injektionsgeschwindigkeit 2. … z. B. an einer Stahloberfläche (Stahlkapillare. Metallsiebchen) 3. Schwache Lampe, Belag in der Zelle 5. Eine ungewollte Änderung des pH-Wertes kann die UV-Absorption beeinflussen 6. Organisches Lösemittel kann bei ungekühltem Autosampler aus dem vial entweichen (anreichern der Probe) |
| ∆ H + ∆ tR, A = konstant | 1. Eluent 2. ∆ stationäre Phase 3. ∆ Temperatur | 1. ∆ P
3. ∆ P Stets: | 1. Falls ∆ pH-Wert des Eluenten, evtl. auch ∆ A |
| ∆ H, A = konstant | ∆ Packungsqualität | tR = konstant, Verschlechterung der Peakform | |
| ∆ tR, ∆ t0, ∆ A, H = fast konstant | ∆ Fluss | ∆ P | Leck, Luft in der Pumpe |
| Schlechte Peakform – alle Peaks | 1. Totvolumen | tR = konstant | |
| Schlechte Peakform – einige Peaks | ∆ pH-Wert | Betroffene Peaks: ∆ tR | Etwas seltener: Instabile Analyte, dadurch evtl. zusätzliche Peaks |
| Doppelpeaks | 1. Hohlraum im Packungsbeet 2. Verbogene Injektionsnadel 3. Substanz liegt in zwei Formen vor |
3. pH-Wert minimal verändern |
